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ELISA試劑盒的理論與實踐
更新時間:2015-11-05   點擊次數(shù):1844次

    在正式展開實驗之前,首先要了解的是理論知識。而理論與實踐都是*的,今日我們?yōu)槟f說ELISA試劑盒理論與實踐的關(guān)系。
    已包被抗原或抗體的固相載體在低溫并且干燥的條件下,一般可以保存6個月,而有些不完整的試盒,僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被。固相載體和包被過程:
    在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)。可作ELISA中載體的材料很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。
    在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。
    在ELISA夾心法中,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。
    從ELISA試劑盒理論來說,溫育采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的生成可達(dá)。
    
看完我們?yōu)槟治龅?strong>ELISA試劑盒相信大家對它們也有了進一步的了解,如果還有其他的問題可以登錄我們公司的咨詢我們的工作人員,我們將竭誠為您解答。

 
  

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