日本视频在线播放 I 国产人体视频 I 亚洲欧美色综合 I 最近最新中文字幕视频 I 粉嫩av一区二区三区 I 777www色69堂 I 国产美女mm131爽爽爽免费 I 91片黄在线观看 I 天天cao在线视频 I 香蕉精品999视频一区二区 I 欧美日韩亚洲国产综合 I 韩国美女被c视频 I 9l视频自拍蝌蚪9l视频在线看 I 日韩亚洲欧美中文高清在线 I 极品少妇xxxx精品少妇偷拍 I 亚洲制服欧美另类 I 天天看片导航 I 日本亚洲精品在线观看 I 亚洲二区在线观看 I 欧美啪啪网站 I 在线亚洲一区 I 蒂蒂有话说动画免费观看 I 男人进入女人下体视频 I 99久久久精品免费观看国产 I 五月天色网站 I 欧美激情视频给我 I 麻豆av在线播放 I 精东影业av一区 I 婷婷综合六月 I 91丨精品丨蝌蚪丨白丝jk I 九色国内视频自拍蝌蚪 I 亚洲国产欧美一区二区丝袜黑人 I 中国女人高潮dh

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > SPA技術理化性質蛋白
SPA技術理化性質蛋白
更新時間:2010-06-30   點擊次數:7068次

金葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A、簡稱SPA)是細胞壁抗原的主要成分,幾乎90%以上的菌株均含有這種成分,但不同的菌株含量差別十分懸殊。SPA占整個細胞壁蛋白成分的6.7%,通過胞壁肽聚糖以共價鍵與之結合。其它葡萄球菌如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌不含SPA。

SPA的理化性質 

SPA是一種蛋白質,由亮、纈、脯、丙、蘇、甘、絲、谷丙、天門冬及賴氨酸等十種氨基酸組成。由于不含有胱氨酸及半胱氨酸,所以無二硫鍵。紫外光譜和吸收系數為A275nm %=1.65,等電點為pH5.1。SPA十分穩定,用4mol/L尿素、硫氰鹽酸、6mol/L的鹽酸胍和pH2.5的酸性條件,以及加熱煮沸均不影響其活性。其分子量因測定方法不同而有所差異。

SPA部分理化參數

分子量
 42 000
 
沉降系數S 20w(ˊS )
 2.10
 
擴散系數D20W(cm2/s)
 4.3×10-7
 
Stocks半徑(nm)
 5.00
 
摩擦比f/f,min
 2.10
 
粘度(n) (ml/g)
 2.90
 
Hμggins常數
 0.66
 
比容V(ml/g)
 0.72
 


 

SPA的免疫學性質 

SPA能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fc片段結合,結合的親和性次序依次是豬、狗、兔、人、猴、鼠、小鼠及牛;對大白鼠、綿羊的親和力差;對馬、犢牛、山羊等無親和力;對所有的魚類、兩棲類、爬行類、鳥類(除少數例外)均不能與之結合。雞的IgG必須與相應的抗原形成復合物才能與SPA結合,原因可能是Ag-Ab復合物改變了IgG的Fc片段的構象。

SPA與IgG結合的亞類主要是IgG1、IgG2和IgG4。

SPA除與IgG結合外,還能與血清中少量的IgM和IgA結合,SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率:IgG為90%~98%,IgM為2%~30%,IgA為1.5%~20%。

出現共沉反應的SPA與IgG必須有兩個結合部位,它們分別在Fc和Fab段上,缺一雖能與SPA結合,但不出現共沉反應,這種Fab的參與并非SPA-抗體反應。現已研究表明,IgG與SPA的結合部位是CH2和CH3的交界處。

SPA的生物學特性

1.免疫原性與過敏原性  SPA做為免疫原能刺激免疫活性細胞合成Ig,又能與其相應抗體的Fab段結合呈現抗原抗體的特異性反應。SPA-IgG注射家兔皮下可引起Arthus樣反應,還可引起豚鼠的遲發性超敏反應。SPA體外試驗,能刺激豚鼠離體回腸收縮。

2.抗吞噬作用  由于IgG的Fc段結合點既是lgG調理活性結合點,又是SPA反應點。因此,SPA可與吞噬細胞競爭,結果抑制了多形核白細胞的吞噬作用,也可能是SPA阻斷調理素與吞噬細胞作用的結果。

3.固定補體  SPA-IgG和免疫復合物一樣可以固定人和某些動物(如豚鼠、豬、狗等)血清中的補體,主要是通過補體傳統激活途徑。

4.促有絲分裂因子  SPA是一種B細胞激活劑,固相SPA作用明顯,并不需要T細胞輔助,可容性SPA作用微弱,必須有T細胞參與。

5.去封閉作用  固相SPA能部分去除腫瘤病人和帶瘤動物血清中的封閉活性,從而降低了血清對淋巴細胞介導的細胞毒的封閉作用。

SPA的應用

SPA應用很廣,但所有應用的原理都離不開SPA具有與IgG的Fc段的結合能力,主要應用方面如下:

1.SPA菌的協同凝集作用

用已知的標準血清,吸附到SPA菌的表面,使之成為吸附抗體的載體,再以此去診斷相應的未知抗原而產生肉眼可見的凝集顆粒,診斷的抗原可以是顆粒性的,也可以是可溶性的。此種凝集相當于反向間接血凝,但省去間接血凝中的抗體純化,紅血球鞣化等復雜手續,而只需要 SPA菌體及粗制免疫血清即可。所以此法簡單、快速,特異性敏感性均較滿意。目前已用于許多細胞和病毒的檢測及分型。

協同凝集只適用于檢測抗原,未見應用于檢測抗體的報道。

2.作為廣譜第二抗體 

用SPA代替抗體IgG的第二抗體,有如下優點:

1.SPA制備容易,性質穩定,易純化,對人和多種哺乳動物的IgG都能應用,不受種屬限制。而第二抗體的制備比較麻煩,且需多次免疫動物,在應用上要受同種屬的限制

2.SPA的結合力強,相當于游離抗體與抗原的結合力,對人和兔的親和常數均為103 L/克分子,結合后對IgG的活性無影響。無論在0℃、37℃、44℃及56℃幾乎均能立即結合而無需長時間的孵育,因此可以縮短試驗時間,第二抗體在較長的孵育中,出現抗原分解的問題也可以得到解決

3.SPA容易標上125 I、熒光素、辣根過氧化物酶、鐵蛋白等,因此可與多種技術相結合

4.在檢查細胞上的病毒抗原時,第二抗體往往特異性不強,會非特異性地與細胞膜上的Fc
 
 
 

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區楓涇鎮環東一路65弄2號3463室

主營產品:酶聯免疫試劑盒,食品農殘檢測,細胞系,培養基,胎牛血清

©2019 版權所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號:滬ICP備14033764號-3  總訪問量:1269733  站點地圖  技術支持:環保在線  管理登陸

主站蜘蛛池模板: 久久久无码精品亚洲日韩蜜臀浪潮 | 亚洲中文无码线在线观看 | 久久精品国产av一区二区三区 | 亚洲国产人成自 | 亚洲色婷婷综合久久 | 最爽无遮挡行房视频 | 国产亚洲产品影市在线产品 | 欧美综合自拍亚洲综合图片区 | 国精品人妻无码一区二区三区喝尿 | 春药玩弄少妇高潮吼叫 | 又紧又大又爽精品一区二区 | 熟睡人妻被讨厌的公侵犯 | 免费精品国产人妻国语三上悠亚 | 久久久橹橹橹久久久久高清 | 国内精品久久久久久久久齐齐 | 亚洲成无码电影在线观看 | 少妇mm被擦出白浆液视频 | 无遮挡色视频免费观看 | 无码精品尤物一区二区三区 | 国产精品原创巨作av | 亚洲日本香蕉视频观看视频 | 久久精品国产一区二区三区 | 性欧美视频videos6一9 | 久久影院九九被窝爽爽 | 无码人妻精品一区二区三区久久久 | 中文字幕无码家庭乱欲 | 邻居少妇张开腿让我爽了在线观看 | 色 综合 欧美 亚洲 国产 | 大帝a∨无码视频在线播放 亚洲综合制服丝袜另类 | 国产福利视频 | 男男啪啪激烈高潮cc漫画免费 | 人妻 偷拍 无码 中文字幕 | 久久无码高潮喷水 | 精品国产乱码一区二区三区 | 亚洲欧美精品综合一区 | 久久精品aⅴ无码中文字字幕重口 | 真人抽搐一进一出gif | 精品无码久久久久国产app | 精品动漫一区 | 国产一区二区三区日韩精品 | 国产精品亚洲日韩欧美色窝窝色欲 |