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上海通蔚生物ELISA試劑盒操作說明、洗滌及注意事項
更新時間:2025-04-30   點擊次數:784次


ELISA試劑盒


ELISA試劑盒操作說明:

1、封板膜只做一次性使用。 

2、標本中待測物質含量過高時先將樣本稀釋一定倍數后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。

3、各步加樣均使用加樣器,并經常校對其正確性,一次加樣時間控制在5分鐘內。

4、液體標本置4℃保存應小于1周,-20℃。


ELISA試劑盒洗板時還應注意以下問題:

1、需每天校正注液量及殘液量,洗滌后殘液量不得大于2μl;

2、及時更換破損吸液針,避免破壞底板包被;

3、針對不同廠家酶標板注意調整吸液頭下降高度,避免沖洗針頭卡住酶標板;

4、注意調整洗液量,洗液量過多將溢出,過少將達不到洗滌效果;

5、關機前使用蒸餾水沖洗管道,避免洗液的結晶物堵塞管道;

6、不同種試劑盒的洗液嚴禁混合使用。


ELISA試劑盒注意事項:

1.邊緣效應 使用96孔板的ELISA測定中,常發現有“邊緣效應",即外周孔顯色較中心孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。在實驗室的常規ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應",并且可提高測定的重復性。

2.加樣在現在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現氣泡則反應液界面有差異。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。


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